SEC（サイズ排除クロマトグラフィー）による抗体凝集体の分析

概要

　抗体医薬品の原薬として使用されるIgGは、製造工程や輸送・保存中に二量体、三量体等の凝集体を形成する場合があることが知られており、副作用を引き起こすリスクが懸念されています。このような観点から、IgG製剤の品質を管理する上で、単量体および凝集体の評価は不可欠となっています。
　本技術資料では、抗体に化学的ストレスを与えて抗体凝集体を調製し、SECにより抗体凝集体を分析した結果について紹介します。

分析方法

　抗体を酸性バッファーに暴露処理（18時間と42時間）し、酸ストレス抗体を調製しました。酸ストレス抗体中には、立体構造が変化し生成した抗体凝集体が存在します。調製した試料について、ストレスを与えていない非ストレス抗体ともに、SECによる測定を行いました【図1】。

　酸ストレスの暴露時間が長くなるとともに、抗体凝集体のピーク面積が増加しています【図2】。
　また、標準タンパク質を用いた分子量較正曲線より、各ピークトップの平均分子量（Mp）は、単量体：126,000、2量体：242,000、3量体：373,000と算出できます。
以上より、SECによる抗体凝集体の分析は、抗体医薬品の製造工程や輸送・保管中に生じることのある凝集体の評価が可能であり、品質管理に貢献いたします。