LC-MSによるインタクト抗体の糖鎖組成解析

概要

　抗体医薬品として広く用いられているIgGは、Y字型の構造をした糖タンパク質であり、生産時の様々な修飾反応の結果、多様な分子構造をとることが知られています（図1）。特に、抗体医薬品において、Fc領域に付加した糖鎖構造が抗体依存性細胞傷害（ADCC）活性に大きく影響することが報告されているため、糖鎖組成の解析は、抗体医薬品の開発や研究において非常に重要になります。
　インタクト抗体^＊のLC-MS測定は、プロテアーゼ処理などの前処理を行わずにそのままの状態で測定するため、抗体に結合した状態の糖鎖組成の解析が可能です（図2）。今回は、市販の抗体医薬品Aを対象として、糖鎖組成を解析した事例を紹介します。
　＊インタクト抗体：プロテアーゼ処理等を行なっていない状態の抗体

試料

　市販の抗体医薬品A

結果

　抗体医薬品Aは、脱塩処理を行った後LC-MS測定を行いました。試料由来の多価イオンのマススペクトルをデコンボリューションにより一価へ変換し、得られた分子量から糖鎖構造を帰属しました（図3）。
　理論質量と比較した結果、各ピークの質量精度は20～30 ppm前後であり、高い質量精度での測定が可能です。また、検出されたイオン強度から、各糖鎖組成の相対存在率も推定できます（表1）。

まとめ

　インタクト抗体のLC-MS測定により、抗体に結合した状態の糖鎖組成の解析が可能です。抗体医薬品等の糖鎖構造の不均一性の解析に有用です。